粗脂肪測定方法
參考標準: GB-T 6433-2006 飼料中粗脂肪的測定
原理:索氏脂肪提取器中用乙醚或石油醚提取試樣,稱提取前后試樣的重量,提取的除脂肪外還有有機酸,磷脂,脂溶性維生素,葉綠素等,因而測定結(jié)果稱粗脂肪或乙醚提取物。
測定步驟:
(1)稱取試樣2-5g用濾紙包好,濾紙包大小應可以全部浸泡于抽提管里石油醚中,并且保證包扎好不漏樣,放105℃烘箱中,烘干2小時,放干燥器中冷卻30min(嚴格遵守),稱重為m1
(2)將濾紙包放入抽提管中,在抽提瓶中加石油醚至三分之二體積處,在60℃的水浴中加熱,使石油醚回流,控制石油醚回流次數(shù)為每小時約10次,抽提8個小時以上。
(3)將濾紙包放入105℃烘箱中烘2h,放干燥器中冷卻30 min(嚴格遵守),稱重m2。
計算:
粗脂肪(%)=
式中:m ——為試樣質(zhì)量;g
m1——抽提前試樣的質(zhì)量;g
m2——抽提后試樣的質(zhì)量;g
注意事項:
(1)對于純動物性飼料(包括乳制品),谷蛋白、酵母、大豆等提取前需要進行酸水解。用3mol/L的鹽酸微沸1小時,在布什漏斗中用雙層濾紙抽濾,并用冷水洗滌至中性,烘干后再進行抽提,濾液表面有油應減少樣品重新水解。
(2)每個試樣取兩平行樣進行測定,以其算術平均值為結(jié)果。粗脂肪含量在10%以上(含10%)允許相對偏差為3%,粗脂肪含量在10%以下時,允許相對偏差為5%
(3)抽提前稱樣與抽提后稱樣,因為屬于絕干物質(zhì),且有吸濕性很強的濾紙存在,因此天平讀數(shù)會持續(xù)上升,必須快速進行稱量,并且以第一次讀數(shù)為稱量值。
(4)保證索氏提取管與提取瓶、冷凝管的接口密封,不密封應在接口處涂抹凡士林保證良好的密封性,以免造成冷凝管上的凝結(jié)水滲入提取管導致不回流,或者石油醚過快揮發(fā)而沒有足夠的體積進行回流。
(5)抽提瓶容量體積為500毫升時,裝入石油醚體積應小于350ml,液面過高,可能造成非壓強性回流,即抽提管內(nèi)石油醚的高度沒有到達回流彎管的高度就發(fā)生回流,而濾紙包不能被完全浸泡。
(6)抽提瓶容量體積應與抽提管回流體積相稱,比如500ml的容量瓶應配置200-300ml的抽提管
(7)包樣品的濾紙不需要預先烘干,因為烘干步驟中已經(jīng)包括了該步驟,但是稱樣時不得直接在濾紙上稱量,因為濾紙過大,容易導致稱量不準確。
(8)稱量時不必記錄濾紙的質(zhì)量,但必須記錄試樣的質(zhì)量。稱量應在稱量紙上或其他合適的稱量器中進行,并使用差量法獲得試樣質(zhì)量。